今天上午,記者從北京大學獲悉,北京大學聯(lián)合中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院組成跨學科團隊,歷經(jīng)三年多時間,成功研制出新一代高速高分辨微型化雙光子熒光顯微鏡,并獲取了小鼠在自由行為過程中大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸活動清晰、穩(wěn)定的圖像。原始論文于5月29日在線發(fā)表于自然雜志子刊,并已申請多項專利。
據(jù)團隊相關(guān)負責人介紹,新一代微型化雙光子熒光顯微鏡體積小,重僅2.2克,適于佩戴在小動物頭部顱窗上,實時記錄數(shù)十個神經(jīng)元、上千個神經(jīng)突觸的動態(tài)信號。在大型動物上,還可望實現(xiàn)多探頭佩戴、多顱窗不同腦區(qū)的長時程觀測。
相比單光子激發(fā),雙光子激發(fā)具有良好的光學斷層、更深的生物組織穿透等優(yōu)勢,其橫向分辨率達到0.65μm,成像質(zhì)量與商品化大型臺式雙光子熒光顯微鏡可相媲美。采用雙軸對稱高速微機電系統(tǒng)轉(zhuǎn)鏡掃描技術(shù),成像幀頻已達40Hz(256*256像素),同時具備多區(qū)域隨機掃描和每秒1萬線的線掃描能力。
此外,采用自主設(shè)計可傳導920nm飛秒激光的光子晶體光纖,該系統(tǒng)首次實現(xiàn)了微型雙光子顯微鏡對腦科學領(lǐng)域最廣泛應(yīng)用的指示神經(jīng)元活動的熒光探針(如GCaMP6)的有效利用。同時采用柔性光纖束進行熒光信號的接收,解決了動物的活動和行為由于熒光傳輸光纜拖拽而受到干擾的難題。未來,與光遺傳學技術(shù)的結(jié)合,可望在結(jié)構(gòu)與功能成像的同時,精準地操控神經(jīng)元和神經(jīng)回路的活動。(法晚微信公號ID:fzwb_52165216)
微型化雙光子熒光顯微成像改變了在自由活動動物中觀察細胞和亞細胞結(jié)構(gòu)的方式,可用于在動物覓食、哺乳、跳臺、打斗、嬉戲、睡眠等自然行為條件下,或者在學習前、學習中和學習后,長時程觀察神經(jīng)突觸、神經(jīng)元、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、遠程連接的腦區(qū)等多尺度、多層次動態(tài)變化。
新一代微型化雙光子熒光顯微成像系統(tǒng)的成功研制是國家重大科研儀器研制專項的一個碩果。目前,該研發(fā)團隊正在領(lǐng)銜建設(shè)“多模態(tài)跨尺度生物醫(yī)學成像”十三五國家重大科技基礎(chǔ)設(shè)施,積極參與即將啟動的中國腦科學計劃。(記者 馬曉晴)